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Alkaline phosphatase Antibody (YA3654) 骨矿化与适应性产热调控研究

26 人阅读发布时间:2026-11-10 13:40

Alkaline phosphatase Antibody (YA3654)(货号 HY-P83957)(www.medchemexpress.cn/antibody/alpl-antibody-ya3654.html)是 MedChemExpress(MCE)推出的一种小鼠来源、无偶联标记、亲和纯化的 IgG1 单克隆抗体,特异性识别内源性碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase, ALPL/TNAP,组织非特异性碱性磷酸酶),反应种属覆盖人、小鼠、大鼠、兔。ALPL 是同时横跨骨矿化、维生素代谢、嘌呤能信号与产热能量代谢的 "多面手" 酶,其基因变异与低磷酸酯酶症(hypophosphatasia)直接相关,是骨骼生物学与代谢研究中的高频靶点,该抗体提供了覆盖多种组织类型与两套抗原修复体系的丰富 IHC-P 验证数据。

一、产品基础理化信息与储存运输规范

Alkaline phosphatase Antibody (YA3654) 核心基础参数如下:品牌 MedChemExpress(MCE),货号 HY-P83957,克隆号 YA3654,为小鼠来源(Mouse)、单克隆、无偶联标记(Non-conjugated)、亲和纯化的 IgG1 抗体,特异性识别内源性 ALPL。预测条带大小 57 kDa,实际观测条带 75 kDa(ALPL 为同源二聚体且高度 N - 糖基化,糖链修饰显著增加表观分子量,实验判定应以实测为准);免疫原为纯化的重组人 ALPL aa18-502 片段(对应成熟蛋白主体区域);对应蛋白数据库编号 P05186(Entrez Gene: 249);反应种属为人、小鼠、大鼠、兔;修饰类型为未修饰(Unmodified)。

产品以溶液形式提供 PBS 缓冲液。运输采用蓝冰运输;-20°C 条件下可稳定保存 1 年,需避免反复冻融;不同批次浓度可能存在差异,具体浓度以对应批次 COA 为准。每个批次均配套 Data Sheet、SDS、COA、抗体使用指南等质检文件。

二、核心产品活性与药理机制

广谱磷酸酯酶: 碱性磷酸酶可代谢多种磷酸化合物,它的底物特异性较广,可水解相当多种类的化合物,但仅有少数底物是天然底物,如二磷酸(无机焦磷酸,PPi)、吡哆醛 - 5'- 磷酸(PLP)和磷酸肌酸。

骨与牙矿化的核心执行者: ALPL 通过水解胞外的强效矿化抑制剂二磷酸(PPi)生成磷酸,在骨骼和牙齿矿化中发挥关键作用,从而促进羟基磷灰石晶体形成,提高无机磷酸盐浓度。它与 PHOSPHO1 在骨骼矿化中以非冗余的方式发挥作用:PHOSPHO1 介导基质小泡(MV)中羟基磷灰石结晶的起始,而 ALPL/TNAP 催化细胞外基质中羟基磷灰石结晶的扩散。两者分处 "点火" 与 "蔓延" 两个环节,缺一不可。此外它还可促进骨桥蛋白(SSP1)的去磷酸化 —— 磷酸化状态的骨桥蛋白是羟基磷灰石结晶的抑制剂,但目前尚不清楚 ALPL/TNAP 是直接还是间接介导 SSP1 的去磷酸化。

维生素 B6 供应: 碱性磷酸酶催化 PLP 去磷酸化生成吡哆醛(PL)—— 维生素 B6 的可转运形式,从而为脑提供充足的 PLP,PLP 是催化多种神经递质合成的酶的必需辅因子。

嘌呤能与病原信号的调节: ALPL 能逐步介导 ATP 降解为腺苷,从而调控嘌呤能受体的配体可用性;它还使微生物产物去磷酸化,如脂多糖(LPS)以及其他磷酸化小分子如聚肌胞苷酸(poly I:C),在先天免疫识别层面起到 "信号减振" 作用。

适应性产热与无效肌酸循环: 作为无效肌酸循环的一部分,碱性磷酸酶是适应性产热的关键调控因子:它定位于产热脂肪细胞的线粒体,通过介导磷酸肌酸水解,启动肌酸去磷酸化和磷酸化的无效循环。在肌酸无效循环过程中,肌酸和磷酸肌酸处于无效循环状态,不执行任何机械或化学功,而是将磷酸肌酸的高能量电荷以热量形式散失。

定位与结构: P05186 存在 3 个异构体(预测约 49-57 kDa),存在 N - 糖基化修饰,以同源二聚体形式存在。亚细胞定位于细胞膜(GPI 脂锚定)、细胞外囊泡膜与线粒体膜 / 膜间隙,GPI 锚定方式决定了它可在膜表面与囊泡间灵活切换。

抗体特异性: Alkaline phosphatase Antibody (YA3654) 针对重组人 ALPL aa18-502 片段制备,可识别人、小鼠、大鼠、兔内源性 ALPL。相关靶点功能信息源自 UniProtKB/Swiss-Prot(P05186)收录注释,具体实验条件以 MCE 产品说明为准。

三、应用验证与功能研究

Alkaline phosphatase Antibody (YA3654) 是验证覆盖面最广的抗体之一:在人源肿瘤与正常组织、小鼠消化道等多类样本上完成了 IHC-P 验证,并采用了两套不同的样本前处理体系。

体系一:人源肿瘤组织(1:200,EDTA 高压修复) 对石蜡包埋的人肺腺癌(多例)、人卵巢癌与人子宫内膜癌组织进行检测:切片经高温高压介导的 EDTA 抗原修复缓冲液(pH 9.0)预处理 5 min,一抗 1:200 室温孵育 60 min,采用 HRP 标记的紧凑型聚合物系统检测,DAB 显色,中性树胶封片。

体系二:小鼠消化道与人正常组织(1:1000,柠檬酸修复过夜) 对石蜡包埋的小鼠胃、小肠、结肠、十二指肠及人肾上腺、人乳腺组织进行检测:切片经柠檬酸钠缓冲液(pH 6.0)热介导抗原修复 8 min,室温快速封闭缓冲液封闭 0.5 h,PBS 与 PBST 洗涤后一抗 1:1000 于 4°C 孵育过夜,HRP 紧凑型聚合物系统检测,DAB 显色,DPX 封片。

两套体系的可借鉴意义: 人源肿瘤采用短时高压 EDTA 修复 + 短时室温孵育(1:200),小鼠消化道采用温和柠檬酸修复 + 过夜 4°C 孵育(1:1000),两种组合均得到可用结果,说明本品对不同修复条件与孵育模式均有良好适应性;消化道组织(胃、小肠、结肠、十二指肠)是 ALPL 高表达部位,可作为理想的阳性对照体系。

应用场景: 骨组织与软骨矿化区域 ALPL 表达定位、肠道上皮刷状缘 ALPL 分布评估、低磷酸酯酶症相关蛋白表达分析、产热脂肪组织(棕色 / 米色脂肪)线粒体 ALPL 检测、肿瘤微环境中 ALPL 表达与功能研究,以及组织非特异性与组织特异性 ALP 同工酶的区分实验。

四、参考文献支撑

该靶点生物学背景信息源自 UniProtKB/Swiss-Prot(P05186)收录的功能注释及相关 PubMed 文献。

五、品牌实力与产品保障体系

Alkaline phosphatase Antibody (YA3654) 所属品牌 MedChemExpress(MCE)抗体产品线围绕蛋白表达检测、信号通路研究、细胞定位、免疫分析及生物医药研发等应用构建,可提供 15,000+ 一抗及 300+ 二抗,涵盖单克隆、多克隆、重组抗体、内参抗体和标签抗体等类型,覆盖自噬、凋亡、细胞周期 / DNA 损伤、铁死亡、免疫炎症及代谢等热门研究方向。MCE 尤其重视抗体的特异性、亲和力、实验适用性和批次稳定性,通过内源性细胞 / 组织、重组蛋白、组织切片、免疫荧光、流式及功能性 ELISA 等多种实验场景进行验证。

MCE 总部位于美国新泽西州,拥有超过 200,000 种生物活性分子,严格遵循 ISO 9001:2015、ISO 17025、ICH Q7 等质量体系,配备 400 多台精密仪器与 1000 名研发分析人员,依托分子 / 蛋白 / 细胞 / 体内四大生物验证平台完成药效评估。目前 MCE 产品已服务全球 13,000 余家科研机构,累计获 Nature、Cell、Science 等顶刊引用超 85,000 次;全球仓储中心覆盖北美、中国、欧洲、日本等地区,90% 区域实现次日达,并提供 7×24 小时专业服务。

六、总结与科研应用展望

Alkaline phosphatase Antibody (YA3654) 指向的 ALPL/TNAP 是一个把 "磷酸基团" 当作通用货币来使用的酶:在骨基质中,它拆掉 PPi 这把抑制矿化的锁,让羟基磷灰石得以蔓延;在脑内,它拆掉 PLP 上的磷酸,把维生素 B6 送上转运通道;在血管与免疫界面,它拆掉 LPS、poly (I:C) 上的磷酸,削弱过度的先天免疫激活;而在产热脂肪的线粒体里,它拆的则是磷酸肌酸 —— 拆下来的高能磷酸键不做任何功,直接以热量释放,构成 "无效肌酸循环" 这一精巧的产热策略。同一催化活性在五种场景下服务于五种截然不同的生理目标,这也解释了为何 ALPL 缺陷(低磷酸酯酶症)会同时表现为骨骼矿化障碍与全身性问题。该抗体以两套修复 / 孵育体系、覆盖人源肿瘤与小鼠消化道共 10 类组织的验证结果,为研究者在不同样本类型间切换提供了可直接参照的条件起点;消化道与肾上腺组织可作为稳定阳性对照。依托扎实的靶点生物学背书与严格品控体系,该抗体将持续为骨代谢、矿化生物学与能量代谢研究提供支持。

 

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