CD80 Antibody (YA3963) CD28 共刺激信号与免疫检查点调控研究

CD80 Antibody (YA3963)（货号 HY-P84266）（www.medchemexpress.cn/antibody/cd80-antibody-ya3963.html）是 MedChemExpress（MCE）推出的一种小鼠来源、无偶联标记、亲和纯化的 IgG1 单克隆抗体，特异性识别内源性 CD80（B7-1、B7.1、CD28LG1），反应种属覆盖人、小鼠、大鼠、兔。CD80 是 T 细胞活化的关键共刺激配体，与 CD28、CTLA-4、PD-L1 三个免疫检查点分子均有直接相互作用，是肿瘤免疫、自身免疫与免疫治疗机制研究的核心靶点，该抗体提供了覆盖 IHC-P 与流式细胞术的完整检测方案。

一、产品基础理化信息与储存运输规范

CD80 Antibody (YA3963) 核心基础参数如下：品牌 MedChemExpress（MCE），货号 HY-P84266，克隆号 YA3963，为小鼠来源（Mouse）、单克隆、无偶联标记（Non-conjugated）、亲和纯化的 IgG1 抗体，特异性识别内源性 CD80。预测条带大小 33 kDa，实际观测条带 50-75 kDa（CD80 为糖基化修饰的 I 型跨膜蛋白，糖链与棕榈酰化使其在 SDS-PAGE 中迁移明显上移，形成宽带，实验判定应以实测为准）；免疫原为大肠杆菌中表达的纯化重组人 CD80 片段（aa35-288，即胞外 IgV 与 IgC 结构域）；对应蛋白数据库编号 P33681（Entrez Gene: 941）；反应种属为人、小鼠、大鼠、兔；修饰类型为未修饰（Unmodified）。

产品以溶液形式提供 PBS 缓冲液。运输采用蓝冰运输；-20°C 条件下可稳定保存 1 年，需避免反复冻融；不同批次浓度可能存在差异，具体浓度以对应批次 COA 为准。每个批次均配套 Data Sheet、SDS、COA、抗体使用指南等质检文件。

二、核心产品活性与药理机制

CD28 共刺激主轴： CD28/CD80 是属于免疫球蛋白超家族的共刺激分子对，在 T 淋巴细胞活化中发挥重要作用。CD80 与组成型表达于 T 细胞表面的 CD28 受体共同作用，作为主要辅助信号增强初始 T 细胞中的 MHC/TCR 信号；进而激活 NF-κB 或 MAPK 等不同信号通路，最终导致多种细胞因子的产生。

代谢重编程： CD28/CD80 共刺激信号还通过激活 PI3K/Akt 信号通路刺激 T 细胞的葡萄糖代谢和 ATP 合成，这一代谢基础是共刺激后 T 细胞能够快速扩增的前提。

三重分子相互作用： CD80 以同源二聚体形式存在，同时与三个免疫检查点分子结合 —— 与 CD28 相互作用（激活 T 细胞）、与 CTLA4 相互作用（抑制 T 细胞活化）、与 PDL1/CD274 相互作用（阻断 PD-L1/PDCD1 的结合，从而阻断 PD-L1/CD274 的抑制功能）。这意味着 CD80 本身即是一个 "潮汐开关"：其表面可用量决定共刺激与共抑制信号的相对占比。

B 细胞与生发中心： CD80 表达于 B 细胞表面，在早期和晚期生发中心反应中，对 B 细胞和 T 细胞之间的相互作用起着关键调节作用。

棕榈酰化与蛋白稳定性： CD80 由 ZDHHC20 进行棕榈酰化修饰；棕榈酰化可保护 CD80 免受泛素介导的降解，调节蛋白质稳定性，并确保其准确定位于质膜。这一修饰层为 CD80 的功能调控增加了翻译后层面的变量。

表达与定位： CD80 定位于细胞膜，为单次跨膜 I 型膜蛋白；在活化的 B 细胞、巨噬细胞和树突状细胞上表达。P33681 存在 3 个异构体（预测约 19-33 kDa）。

抗体特异性： CD80 Antibody (YA3963) 针对重组人 CD80 胞外区片段（aa35-288）制备，可特异性识别人、小鼠、大鼠、兔内源性 CD80。相关靶点功能信息源自 UniProtKB/Swiss-Prot（P33681）收录注释，具体实验条件以 MCE 产品说明为准。

三、应用验证与功能研究

CD80 Antibody (YA3963) 已在 5 种人组织切片中完成 IHC-P 验证，并在小鼠 C2C12 细胞中完成流式细胞术验证，是本品验证数据最为丰富的抗体之一。

免疫组化（IHC-P）： 以 1:600 推荐稀释比，分别对石蜡包埋的人子宫附属器、人间皮瘤、人食管、人乳腺癌与人胃癌组织进行检测：切片经高温介导的 EDTA 抗原修复缓冲液（pH 9.0）预处理 20 min，一抗室温孵育 20 min，采用 HRP 标记的紧凑型聚合物系统检测，DAB 显色，中性树胶封片。多组织覆盖（正常子宫附属器与食管 + 间皮瘤 / 乳腺癌 / 胃癌三类肿瘤）体现了对生理与病理状态下 CD80 表达的适应性：CD80 属诱导型表达，需在肿瘤浸润免疫细胞与肿瘤微环境中分别观察其分布。

流式细胞术（FC）： 取 1×10⁶ 个 C2C12 细胞，以 1/400 稀释的一抗在 4°C 孵育 1 h；AF488 标记的山羊抗小鼠 IgG H&L（HY-P8005）以 1/1000 稀释在 4°C 孵育 30 min；小鼠 IgG 同型对照（HY-P80757）作为同型对照，未与一抗孵育的细胞作为未标记对照。三通道（样品 / 同型 / 未标记）对照设计是流式判读 CD80 这类膜表面诱导型分子的规范做法，可有效排除非特异性结合背景。

应用场景： 肿瘤组织免疫微环境中 CD80⁺ 抗原呈递细胞（APC）的分布评估、DC 疫苗与 CAR-T 研究中 APC 活化状态检测、CD80/CTLA-4/PD-L1 三方竞争关系的机制验证、ZDHHC20 介导棕榈酰化对 CD80 膜稳定性影响的实验分析，以及活化 B 细胞与生发中心反应研究。

四、参考文献支撑

[1]. Lu B, et al. zDHHC20-driven S-palmitoylation of CD80 is required for its costimulatory function. Acta Pharmacol Sin. 2024 Jun;45(6):1214-1223. [2]. Collins AV, et al. The interaction properties of costimulatory molecules revisited. Immunity. 2002 Aug;17(2):201-10. [3]. Boulougouris G, et al. IL-2-independent activation and proliferation in human T cells induced by CD28. J Immunol. 1999 Aug 15;163(4):1809-16. [4]. Frauwirth KA, et al. The CD28 signaling pathway regulates glucose metabolism. Immunity. 2002 Jun;16(6):769-77. [5]. Kennedy A, et al. The CTLA-4 immune checkpoint protein regulates PD-L1:PD-1 interaction via transendocytosis of its ligand CD80. EMBO J. 2023 Mar 1;42(5):e111556.

此外，MCE 顾客使用本产品已发表 1 篇科研文献。

五、品牌实力与产品保障体系

CD80 Antibody (YA3963) 所属品牌 MedChemExpress（MCE）抗体产品线围绕蛋白表达检测、信号通路研究、细胞定位、免疫分析及生物医药研发等应用构建，可提供 15,000+ 一抗及 300+ 二抗，涵盖单克隆、多克隆、重组抗体、内参抗体和标签抗体等类型，覆盖自噬、凋亡、细胞周期 / DNA 损伤、铁死亡、免疫炎症及代谢等热门研究方向。MCE 尤其重视抗体的特异性、亲和力、实验适用性和批次稳定性，通过内源性细胞 / 组织、重组蛋白、组织切片、免疫荧光、流式及功能性 ELISA 等多种实验场景进行验证。

MCE 总部位于美国新泽西州，拥有超过 200,000 种生物活性分子，严格遵循 ISO 9001:2015、ISO 17025、ICH Q7 等质量体系，配备 400 多台精密仪器与 1000 名研发分析人员，依托分子 / 蛋白 / 细胞 / 体内四大生物验证平台完成药效评估。目前 MCE 产品已服务全球 13,000 余家科研机构，累计获 Nature、Cell、Science 等顶刊引用超 85,000 次；全球仓储中心覆盖北美、中国、欧洲、日本等地区，90% 区域实现次日达，并提供 7×24 小时专业服务。

六、总结与科研应用展望

CD80 Antibody (YA3963) 所针对的 CD80 是一个 "会同时向三个方向伸手" 的分子：向 CD28 伸手是踩油门，向 CTLA-4 伸手是踩刹车，向 PD-L1 伸手则是替对方拆掉刹车 —— 三种相互作用的相对权重，决定了局部免疫应答的走向。更微妙的是，ZDHHC20 介导的棕榈酰化像一道 "锁扣"，把 CD80 稳定地固定在质膜上；一旦锁扣脱落，蛋白即被泛素化降解，共刺激能力随之丧失。这种 "表达量 + 膜驻留 + 竞争性结合" 三层调控，使得 CD80 的检测不能只看总量，还需要关注其亚细胞定位与同型竞争背景。该抗体以 1:600 在五种人组织（含三类肿瘤）中给出的清晰 IHC-P 结果，以及带完整同型 / 未标记双对照的流式方案，为这类精细判读提供了可靠起点。依托扎实的靶点背景与严格的品控体系，该抗体将持续为共刺激信号、免疫检查点互作与肿瘤免疫微环境研究提供支持。