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HP1 gamma Antibody (YA5464) H3K9me 异染色质与昼夜节律调控研究

0 人阅读发布时间:2026-11-11 10:20

HP1 gamma Antibody (YA5464)(货号 HY-P85772)(www.medchemexpress.cn/antibody/hp1%CE%B3-antibody-ya5464.html)是 MedChemExpress(MCE)推出的一种小鼠来源、无偶联标记、亲和层析纯化的单克隆抗体,特异性识别内源性 HP1γ(Heterochromatin protein 1 homolog gamma,又称 Chromobox protein homolog 3/CBX3、Modifier 2 protein、HECH),反应种属覆盖人、小鼠、大鼠。HP1γ 是 HP1 家族三个旁系同源成员(HP1α/CBX5、HP1β/CBX1、HP1γ/CBX3)之一,三者均含染色质结构域,但功能分工与表达模式存在差异,HP1γ 因同时参与经典异染色质沉默与活跃转录区调控而别具研究价值。

一、产品基础理化信息与储存运输规范

HP1 gamma Antibody (YA5464) 核心基础参数如下:品牌 MedChemExpress(MCE),货号 HY-P85772,克隆号 YA5464,为小鼠来源(Mouse)、单克隆、无偶联标记(Non-conjugated)、亲和层析纯化的抗体,特异性识别内源性 HP1γ。实测条带大小 24 kDa(产品页未标注预测值;HP1γ 为约 180 个氨基酸的小分子量蛋白,若实验中观察到明显高于 24 kDa 的信号,需先排除二聚体或与其他 HP1 家族成员的交叉反应);免疫原为 HP-1γ 重组蛋白;对应蛋白数据库编号 Q13185(Entrez Gene: 11335);反应种属为人、小鼠、大鼠;修饰类型为未修饰(Unmodified)。

产品以液体形式提供 PBS 缓冲液。运输采用蓝冰运输;-20°C 条件下可稳定保存 1 年,需避免反复冻融;不同批次浓度可能存在差异,具体浓度以对应批次 COA 为准。每个批次均配套 Data Sheet、SDS、COA、抗体使用指南等质检文件。

二、核心产品活性与药理机制

H3K9me 识别与表观遗传抑制: HP1γ 似乎参与异染色质样复合物中的转录沉默。它可识别并结合在 "Lys-9" 位点甲基化的组蛋白 H3 尾部,引发表观遗传抑制。这一 "阅读器" 功能是 HP1 家族的核心机制:染色质结构域(chromodomain)识别 H3K9me2/3 后,通过染色质阴影结构域(chromodomain shadow domain)招募下游效应蛋白,形成 "甲基化写入 — 识别 — 再写入" 的自我扩散循环。

核膜锚定: HP1γ 可能通过与层粘连蛋白 B 受体(LBR)相互作用,促进异染色质与核内膜结合。这一功能把 HP1γ 与核被结构直接相连,参与周边异染色质(pericentric/peripheral heterochromatin)的形成;在核纤层病变研究中具有观察价值。

动粒组装: HP1γ 通过与 MIS12 复合物蛋白相互作用,参与功能性动粒的形成;其与 MIS12 和 DSN1 的互作(PubMed: 15502821)说明它在有丝分裂染色体分离机器中也有一席之地。

昼夜节律调控: HP1γ 通过 H3"Lys-9" 三甲基化,促进局部染色质转换为异染色质样抑制状态,还可介导 PER 复合物将甲基转移酶 SUV39H1 和 / 或 SUV39H2 招募至昼夜节律靶基因(如 PER2 或 PER1 本身)的 E-box 元件上。这一环路尤其精巧:PER 蛋白(负反馈抑制因子)反过来招募 HP1γ,把时钟基因的染色质 "关上",形成转录抑制的锁存机制 —— 这正是生物钟维持 24 小时周期精度的分子基础之一。

DNA 损伤响应: HP1γ 介导 NIPBL 被招募至 DNA 双链断裂(DSB)的损伤位点,把异染色质蛋白与黏连蛋白装载因子连接到 DNA 修复过程。

相互作用网络: HP1γ 直接与 CHAF1A 结合;与赖氨酸 9 位点甲基化的组蛋白 H3 相互作用(PubMed: 11242053);是 G0 期 E2F6.com-1 复合物的组成部分(该复合物由 E2F6、MGA、MAX、TFDP1、CBX3、BAT8、EUHMTASE1、RING1、RNF2、MBLR、L3MBTL2 和 YAF2 组成);并与 INCENP、TRIM28/TIF1B、KMT5B、KMT5C、SP100、TIF1A、MIS12、DSN1、POGZ、CHAMP1、TTLL12、ZNF263、CHD3、CHD4 等蛋白相互作用。其中通过 PxVxL 基序(HP1 的经典结合模块)与 NIPBL、LRIF1 结合(PubMed: 28167679、23542155),体现了 HP1γ 招募网络的结构特异性。

亚细胞定位: HP1γ 定位于细胞核,在显微镜下通常呈现为核内散在的异染色质点状分布,与其功能一致。

抗体特异性: HP1 gamma Antibody (YA5464) 以 HP-1γ 重组蛋白为免疫原,可识别人、小鼠、大鼠内源性 HP1γ(24 kDa)。相关靶点功能信息源自 UniProtKB/Swiss-Prot(Q13185)收录注释,具体实验条件以 MCE 产品说明为准。

三、应用验证与功能研究

HP1 gamma Antibody (YA5464) 已在两组独立的 WB 实验中完成跨物种、跨样本类型验证。

Western blot(WB,第一组・细胞系): 以 1:1000 推荐稀释比,对 HT-1080(泳道 1)、SH-SY5Y(泳道 2)、HepG2(泳道 3)、A549(泳道 4)与 Caco-2(泳道 5)细胞提取物(各 25 μg)进行检测:使用 Trans-Blot® Turbo™ 系统将蛋白转移至 0.45 μm NC 膜,转移时间 13 min;5% 脱脂奶粉 / TBST 溶液(HY-K1025)室温封闭 1 h;一抗与内参 β-actin-HRP 抗体(HY-P80993,1:10000)用同一封闭液稀释,4°C 孵育过夜;HRP 标记山羊抗小鼠 IgG(H&L)二抗(HY-P8004,1:5000)室温孵育 1 h;超高灵敏度 ECL(HY-K1005)显色。

Western blot(WB,第二组・细胞与组织): 以 1/1000 推荐稀释比,对 MCF-7(泳道 2,20 μg)、HeLa(泳道 3,20 μg)、小鼠结肠组织(泳道 4,20 μg)与大鼠睾丸组织(泳道 5,20 μg)提取物进行检测:蛋白转移至 PVDF 膜,5% 脱脂奶粉 / TBST 室温封闭 2 h,一抗与 β-actin(HY-P80993,1/10000)4°C 孵育过夜,山羊抗小鼠 IgG-HRP(HY-P8004,1/10000)室温孵育 1 h。

验证覆盖面分析: 两组实验合计覆盖 7 种人源细胞系(纤维肉瘤、神经母细胞瘤、肝癌、肺癌、结肠癌、乳腺癌、宫颈癌)与小鼠结肠、大鼠睾丸两类组织,全面支持 "Human, Mouse, Rat" 跨物种声明,也验证了本品在细胞与组织裂解液中均能稳定工作。值得注意的是同一靶点在两组实验中使用了不同的膜材(NC 与 PVDF)与二抗浓度(1:5000 与 1/10000),说明抗体对实验条件的宽容度较高。内参统一采用 HRP 直标 β-actin,可与核蛋白信号形成互补对照。

应用场景: 异染色质结构与分布观察(建议结合 ICC/IF 与 DAPI 共染,确认核内点状信号)、H3K9me3 修饰水平与 HP1γ 结合状态的关联分析、昼夜节律基因(PER1/PER2)染色质沉默机制研究、DNA 双链断裂位点的 NIPBL 招募实验、核纤层与 LBR 互作研究,以及 HP1 三个家族成员(CBX5/CBX1/CBX3)的表达差异比较。

四、参考文献支撑

该靶点生物学背景信息源自 UniProtKB/Swiss-Prot(Q13185)收录的功能注释及相关 PubMed 文献(PubMed: 11242053、15502821、28167679、23542155 等)。

五、品牌实力与产品保障体系

HP1 gamma Antibody (YA5464) 所属品牌 MedChemExpress(MCE)抗体产品线围绕蛋白表达检测、信号通路研究、细胞定位、免疫分析及生物医药研发等应用构建,可提供 15,000+ 一抗及 300+ 二抗,涵盖单克隆、多克隆、重组抗体、内参抗体和标签抗体等类型,覆盖自噬、凋亡、细胞周期 / DNA 损伤、铁死亡、免疫炎症及代谢等热门研究方向。MCE 尤其重视抗体的特异性、亲和力、实验适用性和批次稳定性,通过内源性细胞 / 组织、重组蛋白、组织切片、免疫荧光、流式及功能性 ELISA 等多种实验场景进行验证。

MCE 总部位于美国新泽西州,拥有超过 200,000 种生物活性分子,严格遵循 ISO 9001:2015、ISO 17025、ICH Q7 等质量体系,配备 400 多台精密仪器与 1000 名研发分析人员,依托分子 / 蛋白 / 细胞 / 体内四大生物验证平台完成药效评估。目前 MCE 产品已服务全球 13,000 余家科研机构,累计获 Nature、Cell、Science 等顶刊引用超 85,000 次;全球仓储中心覆盖北美、中国、欧洲、日本等地区,90% 区域实现次日达,并提供 7×24 小时专业服务。

六、总结与科研应用展望

HP1 gamma Antibody (YA5464) 所标记的 HP1γ 是染色质 "阅读器" 家族中最忙碌的成员之一:它既守在核膜内侧、借 LBR 之手把异染色质固定在细胞核边缘,又能跑去有丝分裂的动粒上参与染色体分配的机械装配;既能在昼夜节律基因的 E-box 上配合 PER 复合物把染色质关成静默状态,又能在 DNA 断裂点上把 NIPBL 请来协助修复。这种 "同一蛋白、四处上岗" 的行为,源于它那枚染色质结构域识别 H3K9me 之后、再由阴影结构域通过 PxVxL 基序招募各色伙伴的通用逻辑 —— 靶点不同,机制却一致。研究 HP1γ 时需注意其与 HP1α/CBX5、HP1β/CBX1 的高度同源性,任何抗体都应先验证家族内判别能力;本品以重组蛋白为免疫原、在 7 种细胞系与两类组织中以两组独立条件完成验证,24 kDa 条带明确,可作为染色体生物学研究的稳定参照。依托扎实的靶点背书与严格品控体系,该抗体将持续为表观遗传调控、染色质高级结构与生物钟研究提供支持。

 

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