BCLAF1 Antibody (YA7155) CCND1 mRNA 稳定性与转录抑制调控研究

BCLAF1 Antibody (YA7155)（货号 HY-P87468）（www.medchemexpress.cn/antibody/bclaf1-antibody-ya7155.html）是 MedChemExpress（MCE）推出的一种兔来源、无偶联标记、重组 IgG 单克隆抗体，特异性识别内源性 BCLAF1（Bcl-2-associated transcription factor 1，又称 BTF、KIAA0164），反应种属覆盖人、小鼠、大鼠。BCLAF1 最初因能与 Bcl-2 相关蛋白相互作用而被发现，后续研究揭示其在转录抑制、mRNA 稳定性调控与核斑结构组织中的多重功能，是细胞周期调控与转录后基因表达研究中的关注靶点。本品采用 Protein A 亲和纯化与 Proclin300 防腐体系，批次稳定性与长期保存表现较好。

一、产品基础理化信息与储存运输规范

BCLAF1 Antibody (YA7155) 核心基础参数如下：品牌 MedChemExpress（MCE），货号 HY-P87468，克隆号 YA7155，为兔来源（Rabbit）、重组单克隆、无偶联标记（Non-conjugated）、Protein A 亲和纯化的 IgG 抗体，敏感性为内源性（Endogenous），即识别天然表达水平而非仅过表达蛋白。预测条带大小 106 kDa，实际观测条带 150 kDa（BCLAF1 富含丝氨酸 / 精氨酸富集（RS）样低复杂度区域，这类区域会显著降低 SDS 结合效率并延缓迁移，从而使表观分子量大幅上移；实验判定必须以 150 kDa 实测条带为准）；免疫原为源自人 BTF 的合成肽（aa60-120/920）；对应蛋白数据库编号 Q9NYF8；反应种属为人、小鼠、大鼠；修饰类型为未修饰（Unmodified）。

产品以溶液形式提供，组分为 10 mM 磷酸盐缓冲液（pH 7.4），含 150 mM 氯化钠、0.05% BSA、0.02% Proclin300 与 50% 甘油。运输采用蓝冰运输；-20°C 条件下可稳定保存 1 年，需避免反复冻融；不同批次浓度可能存在差异，具体浓度以对应批次 COA 为准。每个批次均配套 Data Sheet、SDS、COA、抗体使用指南等质检文件。

二、核心产品活性与药理机制

促死亡的转录抑制因子： BCLAF1 是一种促死亡的转录抑制因子。与多数以 "促增殖" 为主线的核蛋白不同，BCLAF1 的功能方向偏向抑制 —— 它通过抑制特定基因的转录，参与细胞命运向死亡或停滞方向的转向。

SNARP 复合物与 CCND1 双层面调控： BCLAF1 可能通过 SNARP 复合物参与调控细胞周期蛋白 D1/CCND1 的 mRNA 稳定性，该复合物可同时结合 CCND1 基因的 3' 端及其 mRNA。这一机制颇具特点：同一复合物既在 DNA 层面作用于基因 3' 端（影响转录过程），又在 RNA 层面结合成熟 mRNA（影响其半衰期），形成 "上下双锁" 的调控格局。CCND1 是 G1/S 期转换的关键驱动因子，因此 BCLAF1 对它的双重抑制，可解释该蛋白促死亡 / 促停滞表型的部分分子基础。

亚细胞分布与核斑： BCLAF1 定位于细胞质、细胞核、核斑（nuclear speckle）与核质。核斑是剪接因子与 RNA 加工机器的富集区域，BCLAF1 在此定位与其参与 mRNA 加工和稳定性的功能一致。研究中若仅观察核质均匀染色而忽略核斑点状信号，可能低估其功能相关性。

表达与修饰： 组织特异性表现为普遍存在（ubiquitous）。Q9NYF8 存在 4 个异构体（预测约 86-106 kDa）。该蛋白存在 PADI4 介导的瓜氨酸化修饰 ——PADI4 是类风湿关节炎等疾病中的关键酶，这提示 BCLAF1 的瓜氨酸化形式可能与自身免疫相关病理机制存在关联。

相互作用： BCLAF1 与 Bcl-2 相关蛋白、EMD（emerin）、腺病毒 E1B 19 kDa 蛋白以及 DNA 相互作用。其中与腺病毒 E1B 19 kDa 蛋白的结合，解释了该蛋白名称中的 "Bcl-2-associated" 由来；与 EMD 的互作则把其功能与核膜结构联系起来。

抗体特异性： BCLAF1 Antibody (YA7155) 针对人 BTF aa60-120 合成肽制备，敏感性标注为内源性，可特异性识别人、小鼠、大鼠内源性 BCLAF1（150 kDa）。相关靶点功能信息源自 UniProtKB/Swiss-Prot（Q9NYF8）收录注释，具体实验条件以 MCE 产品说明为准。

三、应用验证与功能研究

BCLAF1 Antibody (YA7155) 已在六种人源细胞系中完成 WB 验证，样本覆盖面广，且实验条件记录完整。

Western blot（WB）： 以 1:1000 推荐稀释比，对 293T（泳道 2）、MCF-7（泳道 3）、HeLa（泳道 4）、A549（泳道 5）、HT-1080（泳道 6）与 Caco-2（泳道 7）细胞提取物（各 25 μg）进行检测：使用 Trans-Blot® Turbo™ 系统将蛋白转移至 0.45 μm PVDF 膜，转移时间 13 min；膜以 5% 脱脂奶粉 / TBST 溶液（封闭液 HY-K1025）室温封闭 1 h；一抗（1:1000）与内参 GAPDH-HRP 抗体（HY-P80954A，1:5000）用同一封闭液稀释，4°C 孵育过夜；洗涤后以 HRP 标记山羊抗兔 / 鼠 IgG 二抗（HY-P8001/HY-P8004，1:5000）室温孵育 1 h；采用超高灵敏度 ECL 化学发光检测试剂盒（HY-K1005）显色。

条件设计要点： 0.45 μm PVDF 膜是检测大分子量蛋白的必需配置（常规 0.2 μm 膜对 150 kDa 蛋白转印效率偏低）；Trans-Blot Turbo 13 min 的半干快速转印方案能够兼顾效率与高分子量保留；内参选用 HRP 直标 GAPDH 可省去内参二抗孵育步骤。六种细胞系涵盖胚胎肾（293T）、乳腺癌（MCF-7）、宫颈癌（HeLa）、肺癌（A549）、纤维肉瘤（HT-1080）与结肠癌（Caco-2），既验证了抗体的广谱适用性，也为不同细胞背景下的表达差异比较提供了基线。

应用场景： CCND1 表达与 mRNA 稳定性调控研究、细胞周期 G1/S 转换机制分析、核斑结构与剪接因子共定位观察（建议配合 ICC/IF 使用）、细胞死亡与存活平衡的分子机制验证、PADI4 介导瓜氨酸化修饰的检测（需配合抗瓜氨酸化抗体），以及腺病毒 E1B 19 kDa 蛋白互作实验。

四、参考文献支撑

该靶点生物学背景信息源自 UniProtKB/Swiss-Prot（Q9NYF8）收录的功能注释及相关 PubMed 文献。

五、品牌实力与产品保障体系

BCLAF1 Antibody (YA7155) 所属品牌 MedChemExpress（MCE）抗体产品线围绕蛋白表达检测、信号通路研究、细胞定位、免疫分析及生物医药研发等应用构建，可提供 15,000+ 一抗及 300+ 二抗，涵盖单克隆、多克隆、重组抗体、内参抗体和标签抗体等类型，覆盖自噬、凋亡、细胞周期 / DNA 损伤、铁死亡、免疫炎症及代谢等热门研究方向。MCE 尤其重视抗体的特异性、亲和力、实验适用性和批次稳定性，通过内源性细胞 / 组织、重组蛋白、组织切片、免疫荧光、流式及功能性 ELISA 等多种实验场景进行验证。

MCE 总部位于美国新泽西州，拥有超过 200,000 种生物活性分子，严格遵循 ISO 9001:2015、ISO 17025、ICH Q7 等质量体系，配备 400 多台精密仪器与 1000 名研发分析人员，依托分子 / 蛋白 / 细胞 / 体内四大生物验证平台完成药效评估。目前 MCE 产品已服务全球 13,000 余家科研机构，累计获 Nature、Cell、Science 等顶刊引用超 85,000 次；全球仓储中心覆盖北美、中国、欧洲、日本等地区，90% 区域实现次日达，并提供 7×24 小时专业服务。

六、总结与科研应用展望

BCLAF1 Antibody (YA7155) 所追踪的 BCLAF1 拥有一种颇为罕见的调控设计：它所在的 SNARP 复合物同时抓住 CCND1 基因的 3' 端与 CCND1 的成熟 mRNA，等于在转录的 "出口" 和转录本的 "寿命" 两个环节上各设一道闸门。对细胞周期而言，这意味着 G1/S 推进的动力被从源头到末端双重削弱，也解释了该蛋白 "促死亡" 表型背后的部分机制。它的核斑定位则暗示其角色不仅限于单个靶基因，更可能参与整个 RNA 加工区室的组织。实验中需要特别注意的是那 150 kDa 的实测条带 ——BCLAF1 的低复杂度结构域使其在胶上 "跑得比实际更重"，若按 106 kDa 去找条带极易误判为无表达；0.45 μm 膜与足够的转印时间同样不可或缺。该抗体以重组单克隆形式制备、采用内源性敏感性设计，并在六种细胞系中以完整记录的标准化流程完成验证，适合作为核 RNA 结合蛋白研究的可靠参照。依托扎实的靶点生物学背书与严格品控体系，该抗体将持续为细胞周期调控与转录后基因表达研究提供支持。