Wnt-1 Antibody (YA3644) 经典 Wnt 通路与骨量稳态研究

Wnt-1 Antibody (YA3644)（货号 HY-P83947）（www.medchemexpress.cn/antibody/wnt1-antibody-ya3644.html）是 MedChemExpress（MCE）推出的一种小鼠来源、无偶联标记、亲和纯化的 IgG1 单克隆抗体，特异性识别内源性 Wnt-1（INT1），反应种属覆盖人、小鼠。Wnt1 兼具 "发育信号" 与 "骨量调节" 双重身份 —— 既是中脑 - 后脑发育不可或缺的形态发生素，又是人类骨量稳态的关键配体，因而成为发育生物学、神经生物学与骨代谢研究中的高频靶点。该抗体在 WB、ICC 与 FC 三类平台上均给出验证结果，适用性较广。

一、产品基础理化信息与储存运输规范

Wnt-1 Antibody (YA3644) 核心基础参数如下：品牌 MedChemExpress（MCE），货号 HY-P83947，克隆号 YA3644，为小鼠来源（Mouse）、单克隆、无偶联标记（Non-conjugated）、亲和纯化的 IgG1 抗体，特异性识别内源性 Wnt-1。预测条带大小 41 kDa，实际观测条带 45 kDa（Wnt1 为分泌型糖蛋白，含 N - 糖基化与棕榈油酰化修饰，表观分子量常高于理论值，实验判定应以实测为准）；免疫原为纯化的 WNT1 aa28-370 重组片段（覆盖成熟配体主体区域）；对应蛋白数据库编号 P04628（Entrez Gene: 7471）；反应种属为人、小鼠；修饰类型为未修饰（Unmodified）；RRID: AB_3718801。

产品以溶液形式提供 PBS 缓冲液。运输采用蓝冰运输；-20°C 条件下可稳定保存 1 年，需避免反复冻融；不同批次浓度可能存在差异，具体浓度以对应批次 COA 为准。每个批次均配套 Data Sheet、SDS、COA、抗体使用指南等质检文件。

二、核心产品活性与药理机制

经典 Wnt 配体定位： Wnt1 是一种分泌型 Wnt 配体，它通过 Frizzled/LRP5/6 和 β-catenin 依赖的经典 Wnt 通路介导信号传导，该通路与细胞增殖和分化密切相关。与可通过促进 β-catenin 降解来拮抗经典 Wnt 信号通路的 Wnt5a 相比，Wnt1 作为经典 Wnt 配体，更适合以 β-catenin 为中心的实验设计 —— 这一 "配体类型" 的区分对实验选型至关重要。

中脑 - 后脑发育： 从机制上讲，Wnt1 具有重要的发育意义，因为 Wnt1 基因敲除小鼠会缺失中脑和邻近的小脑成分，表明其对中脑 - 后脑发育至关重要。这一表型也是 "Wnt1-Cre" 这一经典遗传学工具得以广泛使用的生物学基础。

骨量调控与人骨疾病： 在以疾病为导向的骨骼研究中，WNT1 突变会导致早发性骨质疏松症和成骨不全症，这表明 WNT1 是调节人类骨量的关键配体。Wnt1 突变小鼠模型能够重现骨骼脆弱性，并为成骨不全症机制的实验分析提供支持。需要留意的是，WNT1 在骨中的作用呈现 "双向" 特征：成骨细胞自身分泌的 Wnt1 影响骨形成，而中枢神经系统来源的 Wnt 信号也参与骨量调节，二者不可混为一谈。

分泌与复合物： Wnt1 的亚细胞定位为分泌型，分布于细胞外空间与细胞外基质。它与 AFM（afamin）形成可溶性 1:1 复合物，这可防止寡聚化，并且是维持生物活性所必需的；与 AFM 的复合物可能代表体液中的生理形式。Wnt1 还与 PORCN 相互作用（决定其棕榈油酰化与分泌），与 RSPO1、RSPO2、RSPO3 及 WLS 相互作用（基于相似性推断）。

通路工具提示： PORCN 抑制剂等 Wnt 通路抑制剂可以阻断 Wnt 配体的加工和分泌，为在 Wnt 驱动模型中检测 Wnt 配体依赖性信号提供工具。若在实验中观察到信号减弱，需区分是 "配体表达下降" 还是 "配体分泌受阻" 两种情形，此时本抗体对细胞裂解物中总量与胞外形式的并行检测尤有价值。

抗体特异性： Wnt-1 Antibody (YA3644) 针对 WNT1 aa28-370 重组片段制备，可特异性识别人、小鼠内源性 Wnt-1（45 kDa）。相关靶点功能信息源自 UniProtKB/Swiss-Prot（P04628）收录注释，具体实验条件以 MCE 产品说明为准。

三、应用验证与功能研究

Wnt-1 Antibody (YA3644) 已在 WB、ICC 两类实验体系中完成验证，并附流式细胞术条件，是验证平台覆盖较全的抗体之一。

Western blot（WB）： 以 1/1000 推荐稀释比，对 NIH/3T3（泳道 1，40 μg）与 3T3-L1（泳道 2，40 μg）细胞提取物进行检测：蛋白转移至 NC 膜后，5% 脱脂奶粉 / TBST 室温封闭 2 h，一抗与内参抗体 GAPDH（1/1000）于 4°C 孵育过夜，山羊抗小鼠 IgG-HRP 二抗（1/10000）室温孵育 1 h。两种成纤维细胞系（3T3-L1 为前脂肪细胞模型）构成同源背景下的表达对比，40 μg 上样量对分泌型配体的检测较为妥当。

免疫细胞化学（ICC）： 以 1/50 稀释比，分别标记 HeLa 细胞与小鼠 3T3 细胞：4% 多聚甲醛室温固定 15 min，0.1% Triton X-100 室温透化 10 min，BSA 室温封闭 10 min，一抗 1/50 于 4°C 孵育过夜；AF488 标记 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG H&L（HY-P8005，1/1000）作为二抗，以 PBS 代替一抗作为 "仅二抗" 对照，DAPI 复染细胞核。由于 Wnt1 为分泌型蛋白，ICC 信号应主要呈胞质内质网 / 高尔基区域与细胞外基质分布，而非核内；PBS 替代对照的设计可有效排除二抗非特异背景。

流式细胞术（FC）： 页面同时给出 1×10⁶ 个 HeLa 细胞标记 Wnt-1 抗体进行流式分析的条件（具体二抗与门控细节以产品说明页为准）。对分泌型配体而言，流式检测更适于评价膜表面滞留或细胞内保留形式，需谨慎解读表面染色结果。

应用场景： 经典 Wnt/β-catenin 通路的配体端检测、中脑 - 后脑发育模型（Wnt1-Cre 谱系研究）中的表达验证、成骨细胞与骨组织 Wnt1 表达分析、成骨不全症与早发性骨质疏松相关模型研究，以及 PORCN 抑制剂处理前后配体加工与分泌状态的对照实验。

四、参考文献支撑

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此外，MCE 顾客使用本产品已发表 1 篇科研文献。

五、品牌实力与产品保障体系

Wnt-1 Antibody (YA3644) 所属品牌 MedChemExpress（MCE）抗体产品线围绕蛋白表达检测、信号通路研究、细胞定位、免疫分析及生物医药研发等应用构建，可提供 15,000+ 一抗及 300+ 二抗，涵盖单克隆、多克隆、重组抗体、内参抗体和标签抗体等类型，覆盖自噬、凋亡、细胞周期 / DNA 损伤、铁死亡、免疫炎症及代谢等热门研究方向。MCE 尤其重视抗体的特异性、亲和力、实验适用性和批次稳定性，通过内源性细胞 / 组织、重组蛋白、组织切片、免疫荧光、流式及功能性 ELISA 等多种实验场景进行验证。

MCE 总部位于美国新泽西州，拥有超过 200,000 种生物活性分子，严格遵循 ISO 9001:2015、ISO 17025、ICH Q7 等质量体系，配备 400 多台精密仪器与 1000 名研发分析人员，依托分子 / 蛋白 / 细胞 / 体内四大生物验证平台完成药效评估。目前 MCE 产品已服务全球 13,000 余家科研机构，累计获 Nature、Cell、Science 等顶刊引用超 85,000 次；全球仓储中心覆盖北美、中国、欧洲、日本等地区，90% 区域实现次日达，并提供 7×24 小时专业服务。

六、总结与科研应用展望

Wnt-1 Antibody (YA3644) 所指向的 Wnt1 是一个 "从胚胎到成年都在改写结构" 的配体：胚胎期它缺失会让小鼠失去中脑与部分小脑，成年后它变异则让骨骼变得脆弱 —— 同一分子的两种缺失，揭示了 Wnt 信号在神经发育与骨量稳态中被反复借用的演化逻辑。作为经典 Wnt 配体，它与拮抗经典通路的 Wnt5a 形成清晰的功能对照，这在以 β-catenin 为核心读出的实验设计中是重要的选型依据。其分泌过程依赖 PORCN 的棕榈油酰化，而 AFM 复合物则决定了它在体液中的活性形态，因此检测层面需要区分 "细胞内总量" 与 "胞外功能池" 两类读出 —— 该抗体在 WB（1/1000，胞内裂解物）与 ICC（1/50，含胞外基质分布）上的双重验证，恰好覆盖了这一需求；PBS 替代一抗的对照设计也提升了结果可信度。依托扎实的靶点生物学背书与严格的品控体系，该抗体将持续为 Wnt 通路、神经发育与骨代谢研究提供支持。