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公司新闻/正文
蛋白质也有半衰期! Cycloheximide (CHX) 如何给蛋白质 "算寿命"？
1012 人阅读发布时间：2025-09-05 15:00
Section.01
蛋白质也有半衰期！
蛋白质的......半衰期？是的！这是一个通用术语。
在物理学中，半衰期 (Half-life) 是描述放射性核素衰变速率的一个基本概念，指放射性核素衰变至原有数量一半所需的时间。当然，这也是我们最熟知的。而在蛋白质稳态中，蛋白质半衰期也是十分重要的！先看图！
本期为大家介绍研究蛋白质降解的常用方法——Cycloheximide (CHX)。
Section.02
CHX 追踪分析
CHNO₄
CHNO₄(Cycloheximide, CHX) 是一种真核生物蛋白质合成抑制剂，可以与真核细胞蛋白质合成过程中核糖体 60S 亚基的 E-位点结合，阻断核糖体易位过程并阻止新蛋白质的合成，而细胞中已有的蛋白质逐渐降解，通过测定降解速率能检测细胞中特定蛋白质的变化过程。
图 2. CHX 追踪分析[5]。
作为蛋白质翻译阻滞剂，CHX 操作简便，无需使用放射性同位素，不需要考虑正在进行的蛋白质合成的影响，并且可以进行高通量筛选喔~
MCE 验证
为了检测 HCT 116 细胞中 CHX (HY-12320) 对 MDM2、c-Myc 蛋白的稳定性影响，利用 CHX 免疫印记分析 MDM2、c-Myc 蛋白稳定性。结果表明，CHX 促进 MDM2、c-Myc 蛋白的降解，并且表现出不同批次间的一致性。
CHX 追踪案例
CHX 可用于测定不同条件下蛋白质稳定性/半衰期的变化，例如敲除与野生型、过表达或敲低的情况。
以文献研究为例，为了检测 shCtrl 或 shAHI 1 转染的 A549 细胞中 CHX 对 Tyk2 蛋白的稳定性影响，利用Cycloheximide (CHX) 免疫印记分析 Tyk2 蛋白稳定性[6]。
结果表明，CHX 促进 Tyk2 蛋白的降解，而 AHI 1 缺陷显著加速 A549 细胞中 Tyk 2 蛋白的降解。
Section.03
其他监测方法
目前，除了 CHX 法，还有多种不同的方法来监测蛋白质降解率和估计蛋白质半衰期，小 M 为大家整理在下方表格中，包括脉冲追踪测定、质谱技术、CuAAC (铜催化叠氮化物-炔烃环加成物) 标记法[6][7][8][9]。
CHX 追踪案例
为了检测 NSC34 运动神经元细胞中抑制蛋白酶体系统是否可以抵消 CHX 处理后的 a-SMN 快速降解。在存在或不存在 MG 132 的情况下，利用 CHX 免疫印记检测 FL-SMN 和 a-SMN 蛋白的稳定性。结果表明，CHX 促进 FL-SMN 和 a-SMN 蛋白的降解，而 MG 132 延长了 FL-SMN 和 a-SMN 蛋白的半衰期。
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Cycloheximide (CHX) (HY-12320) www.medchemexpress.cn/Cycloheximide.html Cycloheximide，真核生物蛋白质合成抑制剂 |
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MG-132 (HY-13259) www.medchemexpress.cn/MG-132.html 蛋白酶体抑制剂 |
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Carfilzomib (HY-10455) www.medchemexpress.cn/Carfilzomib.html 蛋白酶体抑制剂 |
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Bortezomib (HY-10227) www.medchemexpress.cn/Bortezomib.html 20S 蛋白酶体抑制剂 |
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3-Methyladenine (HY-19312) www.medchemexpress.cn/3-Methyladenine.html 自噬抑制剂；PI3K 抑制剂 |
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Bortezomib (HY-10227) www.medchemexpress.cn/Bortezomib.html 20S 蛋白酶体抑制剂 |
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Bafilomycin A1 (HY-100558) www.medchemexpress.cn/Bafilomycin_A1.html 自噬晚期阶段抑制剂；V-ATPase 抑制剂 |
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MDM2 antibody (HY-P83705) www.medchemexpress.cn/antibody/mdm2-antibody-ya3442.html 可用于人、猴背景下的 WB、ICC/IF、IHC-P 实验 |
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c-Myc antibody (HY-P80626) www.medchemexpress.cn/antibody/c-myc-rabbit-mab.html 用于人、小鼠、大鼠背景下 WB、ICC/IF、IP 实验 |
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[6] Miao Y, et al. Cycloheximide (CHX) Chase Assay to Examine Protein Half-life. Bio Protoc. 2023 Jun 5;13(11):e4690.
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