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361 人阅读发布时间:2025-06-25 16:43
IHC/ICC/IF 总迷糊? 免疫染色为啥感觉那么多?
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免疫染色是基于抗体与其靶抗原的特异性结合 (图 1)。抗原抗体复合物的检测依赖于与抗体偶联的标记物。使用酶时,需要酶的比色法或化学发光法底物。酶催化反应生成有色产物,可使用光学显微镜检测。对于荧光染料,可使用荧光显微镜测量荧光信号,无需额外的底物[1]。



ICC 与 IHC 均属于免疫染色。免疫组化 (Immunohistochemistry, IHC) 是用于检测组织切片中特定抗原或蛋白质,广泛应用于病理学,以诊断癌症等疾病和研究组织特异性蛋白质测定。当应用于细胞学制备时,通常称为免疫细胞化学 (Immunocytochemistry, ICC),其适用于多种细胞学样本,例如细胞块、风干玻片、乙醇固定玻片、直接涂片、细胞离心涂片和液基细胞学 (Liquid-based cytology, LBC) 样本[2][3]。ICC 常用于识别细胞中特定生物标志物的存在、亚细胞定位和原位大分子相互作用[1]。
免疫荧光 (Immunofluorescence, IF) 也是利用抗体和抗原的结合特异性,是免疫染色的一种广泛应用的例子。IHC 通常使用多种不同的酶标记物来检测目标抗原。(当然,IHC 也可升级为多重荧光染色的 mIHC)。ICC 通过使用与抗体偶联的荧光染料或酶,可以分别在荧光显微镜和光学显微镜下可视化目标抗原。IF 利用荧光显微镜检测与抗体结合的荧光染料,此外,IF 可进行多种荧光染色,允许研究人员进行多重标记,IF 的多重染色常用于评估大分子的共定位[1]。

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