BMS-345541是IKK抑制剂

    BMS-345541 hydrochloride是IκB激酶 IKKα 和 IKKβ 的抑制剂，IC50 分别为4 μM 和 0.3 μM。

    MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务

    BMS-345541的生物活性

    体外

    BMS-345541以剂量依赖性方式抑制IKK-2和IKK-1。BMS-345541在高达100μM的浓度下不能抑制一组丝氨酸/苏氨酸和酪氨酸激酶。浓度高达100μM的MS-345541未能阻断茴香霉素刺激的c-Jun磷酸化和LPS刺激的THP-1细胞中MAPKAP K2的激活，以及EGF刺激的H292细胞中STAT3的磷酸化。BMS-345541处理导致SK-MEL-5，A375和Hs 294T细胞中黑素瘤细胞增殖的浓度依赖性抑制。BMS-345541（0,100μM）显示TUNEL染色和核浓缩所揭示的细胞凋亡特征。

    体内

    BMS-345541（10mg / kg，口服）导致血清药物水平延长，在小鼠中浓度持续1μM或高于1μM持续数小时。BMS-345541剂量依赖性地抑制在腹膜内给予LPS的动物血清中测量的TNFα的产生。BMS-345541（0,10,25和75mg / kg，po）在小鼠中以剂量依赖性方式有效抑制SK-MEL-5肿瘤生长。用75mg / kg BMS-345541处理的荷瘤小鼠分别显示出对SK-MEL-5，A375和Hs 294T肿瘤生长的有效抑制86±2.8％，69±11％和67±3.4％。BMS-345541（30和100 mg / kg，po）可有效阻断小鼠炎症和损伤的临床和组织学终点。

    BMS-345541的实验参考方法

    激酶测定

    测量酶催化的GST-IκBα磷酸化的测定通过在30℃下将酶（IKK-2，IKK-1或IKK-ε，通常至终浓度为0.5μg/ mL）添加至100μg的溶液来进行。 / mL的GST-IκBα和5μM[ 33 P] ATP在40个mMTris·HCl的，pH为7.5，含有4毫摩尔MgCl 2，34 mM磷酸钠，3mM的氯化钠，0.6 mM磷酸钾，1mM的kCL，1mM的二硫苏糖醇， 3％（w / v）甘油和250μg/ mL牛血清白蛋白。具体活动[ 33测定中使用的P 1 ATP为100Ci / mmol。5分钟后，通过加入2×LaemmLi样品缓冲液终止激酶反应，并在90℃下热处理1分钟。然后将样品加载到NuPAGE 10％BisTris凝胶上。完成SDS-PAGE后，将凝胶在平板凝胶干燥器上干燥。然后使用445Si PhosphorImager检测条带，并使用ImageQuant软件量化放射性。在这些条件下，GST-IκBα的磷酸化程度与酶的时间和浓度成线性关系。

    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

    细胞分析

    简言之，用不同浓度的BMS-345541或不同时间段处理SK-MEL-5细胞。通过胰蛋白酶消化收集细胞，在冰上在70％乙醇中固定2小时，并在37℃下用PI溶液（含有2μg/ mL PI，0.1％Triton X-100和125单位/ mL RNase A的PBS）染色。 30分钟。通过流式细胞术用488nm激发和620nm发射滤光器测量细胞荧光，并使用软件程序MultiCycle分析所得数据。

    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

    Animal Administration

    BMS-345541通过静脉内尾静脉注射或通过口服管饲给予三只18-22g雌性BALB / c小鼠的组。将BMS-345541配制成在3％吐温80水中的2mg / mL溶液。小鼠接受2mg / kg（1mL / kg）静脉推注或10mg / kg（5mL / kg）口服管饲。在给药后0,0.05,0.25,0.5,1.0,3.0,6.0和8.0小时，通过眼眶放血和心脏穿刺从个体小鼠中取全血样品。将全血以20×10 3 ×g 离心5分钟。将血清储存在-20℃直至分析。

    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

    本文参考自：https://www.medchemexpress.cn/BMS-345541.html